¿Agua peptonada o solución de fosfatos? ¿Sabes cual es el diluyente universal? 

Una de las técnicas más utilizadas en el área de la microbiología de los alimentos es la elaboración de diluciones seriadas que permiten la determinación de mesófilos aerobios totales, de hongos y levaduras, así como de coliformes, entre otros.  

¿Agua peptonada, agua peptonada amortiguada, agua peptonada alcalina, como saber cuál elegir? 

En las diferentes casas comerciales existen diferentes formulaciones del agua peptonada y cada una de ellas diseñada para un objetivo en específico:  

Agua peptonada (5 g de cloruro de sodio y 10 g de peptona de caseína) esta es un medio de cultivo utilizado para realizar la determinación de producción de indol en enterobacterias  

Agua peptonada amortiguada, o bufferada o tamponada (agua peptonada adicionada de sales de fosfato) es un medio de cultivo recomendado en la ISO 6579 así como en la NOM-210-SSA1 para el pre-enriquecimiento de Salmonella sp en muestras de alimentos. 

Agua peptonada alcalina: (agua peptonada a un pH de 8.6) es un medio de cultivo utilizado para el pre-enriquecimiento de muestras que contengan Vibrio sp. 

¿Entonces cual es el diluyente que se debe elegir para realizar las diluciones? 

De acuerdo con la norma de preparación y dilución de muestras de alimentos para su análisis microbiológico la NOM-110-SSA1-1994 indica que se puede hacer uso de la solución de fosfatos o bien de agua peptonada (solución al 0.85% de cloruro de sodio con 1 g de peptona). A partir de esta solución se da la obtención de la dilución primaria, y de ahí se realizan las diluciones seriadas pertinentes para realizar los análisis de interés.  

¿Cuántas diluciones seriadas debo preparar de mi dilución inicial (muestra)? 

Las diluciones decimales incluyen el uso de 1 parte de soluto por 9 partes de diluyente, por ello los volúmenes mas utilizados son de 9 o 90 mL. El número de diluciones seriadas dependerá de los datos estadísticos de cual es la cuenta obtenida. En general cuando se realiza la técnica del número más probable (NMP) se pueden usar 3 o 5 diluciones. En el caso de la cuenta en placa es necesario sembrar hasta 3 diluciones lo importante es que en la placa haya un intervalo de 25 a 250 colonias que puedan ser contables.  

Cuando no se cuentan con datos de referencia se recomienda el uso de 6 diluciones seriadas decimales. 

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